Ruolo degli anticorpi anti-Helicobacter pylori nell'infertilità di coppia

Abstract

Presupposti dello studio. I disordini riproduttivi riguardano approssimativamente il 15-20% delle coppie occidentali e nel 15-30% dei casi si tratta di sterilità idiopatica. Tra le cause di infertilità le infezioni stanno acquisendo un ruolo sempre più importante se si considera che il progetto di concepire un figlio viene spesso procrastinato nel tempo e che la fecondità migliora una volta risolta la causa infettiva. Inoltre, l’infertilità può essere dovuta ad un danneggiamento degli spermatozoi o ad una loro ridotta motilità, situazioni entrambi imputabili a processi infettivi in atto. Recentemente è stata avanzata l’ipotesi di una correlazione tra Helicobacter pylori e sterilità di coppia. Tale batterio è importante causa di patologie gastroduodenali (gastrite cronica, ulcera peptica, cancro gastrico, linfoma MALT) ma è stata ipotizzata una sua implicazione anche in malattie extradigestive, disordini autoimmunitari (per cross-reattività degli anticorpi anti-Helicobacter pylori con cellule epiteliali dell’ospite) e forme di sterilità di coppia, avendo l’infezione da Helicobacter pylori delle ripercussioni sistemiche. Figura N et al. avevano riscontrato la presenza di IgG anti-H. pylori in campioni di liquido follicolare e nelle secrezioni vaginali di donne infertili, oltre che nel loro siero, ed avevano dimostrato l’esistenza di un’omologia strutturale tra la zona equatoriale dello spermatozoo e tre proteine del batterio. In pratica gli anticorpi anti-H. pylori cross-reagiscono con il flagello degli spermatozoi. Il muco cervicale non è stato finora preso in considerazione dai suddetti studi ma è lecito supporre che anticorpi anti-H. pylori contenuti al suo interno potrebbero alterare la penetrazione dei gameti maschili in cavità uterina. Scopo dello studio. Considerato l’importante ruolo svolto dal muco cervicale nel processo riproduttivo per la sua interazione con gli spermatozoi, il nostro studio aveva come obiettivi: valutare la presenza di anticorpi anti-Helicobacter pylori nel siero e nel muco cervicale di donne con sterilità idiopatica, studiare l’eventuale corrispondenza tra i due parametri e verificare la possibile relazione tra infezione femminile e disordine riproduttivo. In particolare, sulla base della già nota cross-reattività tra i suddetti anticorpi ed i gameti maschili, abbiamo indagato l’ipotesi che i primi interferiscano negativamente su penetrazione, diffusione e motilità degli spermatozoi posti nel muco cervicale positivo per gli anticorpi anti-H. pylori. Materiali e metodi. Sono state reclutate 73 pazienti con diagnosi di sterilità idiopatica di coppia, afferite al Centro di Procreazione Medicalmente Assistita del Dipartimento di Scienze Ginecologiche e della Riproduzione Umana dell’Università degli Studi di Padova. In un giorno scelto durante il periodo di picco ovulatorio (come da direttive WHO) a tutte le pazienti sono stati prelevati un campione di siero ed uno di muco cervicale. I sieri sono stati ottenuti mediante centrifugazione, i muchi mediante aspirazione con catetere da MK (catetere per il Test di Kurzrok e Miller). Tutti i campioni sono stati congelati a -20°C e successivamente analizzati, in un’unica sessione, mediante Inova Quanta Lite Helicobacter pylori IgG kit per determinare la concentrazione di IgG anti-H. pylori presenti. Per la prova di compatibilità muco cervicale - liquido seminale, 15 campioni di muco francamente positivi per i suddetti anticorpi (casi) e 15 di muco negativo (controlli) sono stati incubati, su diversi vetrini, con un campione di liquido seminale normospermico. Le interazioni muco - liquido seminale sono state valutate a fresco mediante lo Slide Test o Test di Kurzrok e Miller per verificare penetrazione, diffusione e mobilità degli spermatozoi dopo 15, 60 e 120 minuti. Risultati. Per quanto concerne la ricerca di anticorpi anti-Helicobacter pylori, lo studio ha rivelato una significativa correlazione positiva (r=0,8126; p<0,0001) tra il titolo anticorpale sierico (30% delle pazienti) e la concentrazione delle IgG nel muco cervicale (34%). La prova di compatibilità muco cervicale - liquido seminale ha mostrato una diminuita se non assente motilità degli spermatozoi, con ridotta penetrazione ed alterata diffusione degli stessi all’interno di tutti i 15 campioni di muco positivi per gli anticorpi anti-H. pylori. Conclusioni. Anche se saranno necessari ulteriori studi, è plausibile pensare che l’infezione da Helicobacter pylori, ed in particolare la presenza di IgG anti-H. pylori nel muco cervicale, sia associata a disordini riproduttivi e considerata pertanto tra le cause di sterilità di coppia. Pertanto il dosaggio sierico delle IgG specifiche dovrebbe essere eseguito di routine in tutte le coppie infertili così da selezionare le pazienti a cui proporre il test sul muco cervicale.

Background. Sterility affects about 15-20% of western couples and 15-30% of them present a diagnosis of idiopathic sterility. Among the various causes of infertility, infections are acquiring importance since couples postpone in the time the conception of the first son. The hypothesis of a correlation between Helicobacter pylori and sterility is recent. This bacterium causes first of all gastric-duodenal pathologies (chronic gastritis, peptic ulcer, gastric cancer, MALT lymphoma), but it is also involved in extra-gastric pathologies through autoimmune mechanisms (cross-reaction of anti- Helicobacter pylori antibodies with host epithelial cells). Recently Figura N et al. found anti-H. pylori IgG in serum, follicular fluids and vaginal secretions of infected infertile women and demonstrated that these antibodies cross-react with spermatozoa’s flagella without affecting sperm motility. Aim of the study. Considering the important role of cervical mucus in the reproductive process because of its interaction with spermatozoa, the study’s aim was to evaluate the presence of anti-H. pylori IgG in cervical secretion and serum of women with idiopathic sterility and to investigate how mucus positive for the above mentioned antibodies might affect motility and vitality of male gametes. Materials and methods. It was recruited 73 patients diagnosed with idiopathic sterility, from which we took, at the same day during the ovulatory peak, according to the WHO guidelines, a sample of serum and one of cervical mucus. All the samples were later frozen at -20°C. Subsequently anti-H. pylori IgG concentration was measured in all samples at the same time using “Inova Quanta Lite H. pylori IgG kit”. Sperm-cervical mucus interactions were evaluated in vitro, using fresh samples, in 15 cases with positive mucus for anti-H. pylori IgG and in 15 cases with negative sample, using the Slide Test. Results. The dosage of anti-H. pylori antibodies revealed a significant positive correlation between anti-H. pylori IgG concentrations in serum and in cervical mucus (r=0,8126; p<0,0001). The Slide Test showed, in all 15 tests with positive mucus, a reduced or absent motility of the spermatozoa within the cervical secretion. Conclusions. Although more studies are needed, the presence of anti-H. pylori IgG in the cervical mucus might be considered a new cause of sterility. Serum antibodies should be routinely measured in all infertile couples to select women requiring further studies on the mucus, that is the area where capacitation of spermatozoa occurs.