Chemioterapia: Cardiotossicità ed Immunosoppressione

Abstract

RIASSUNTO La cardiotossicità e la mielosoppressione sono due tra gli effetti collaterali di alcuni agenti chemioterapici che più ne limitano l’utilizzo. Sia in Medicina Umana, sia in Medicina Veterinaria questi effetti secondari, hanno un forte impatto sulla qualità di vita e sulla sopravvivenza stessa del paziente, indipendentemente dal problema oncologico di base. La necessità di identificare precocemente i pazienti a più alto rischio di cardiotossicità ed una eventuale mielosoppressione conseguente al protocollo chemioterapico seguito, diventa un’esigenza molto importante che può portare all’aggiustamento o alla sospensione della terapia oncologica con successivo trattamento cardiologico e/o immuno - modulatore adiuvante. Il primo obbiettivo di questo studio è quello di identificare i farmaci implicati nella cardiotossicità chemioterapica - indotta, al fine di evidenziare precocemente un eventuale danno cardiaco, tramite esami di laboratorio poco invasivi, sensibili, specifici e facilmente ripetibili. Viene quindi proposto, in questo studio, l’utilizzo del dosaggio della Troponina I Cardiaca, quale indicatore di danno cardiaco. La metodica utilizzata è la stessa applicata in medicina umana ossia si basa sull’Immunodosaggio in Chemiluminescenza con particelle paramagnetiche, metodo ACCESS ACCU TnITM sul sistema UNICELL DXL 800. Il secondo obbiettivo è quello di evidenziare gli effetti che alcuni agenti chemioterapici possono avere sul sistema immunitario, ricercando eventuali variazioni nelle sottopopolazioni linfocitarie con l’utilizzo della citometria a flusso, utilizzando il seguente panel anticorpale: CD3, CD4, CD8 e CD21. E’ stato prelevato il sangue da 34 cani suddivisi in due gruppi: n. 10 cani clinicamente sani (gruppo di controllo) e n. 24 cani con tumore. Dei 24 casi di cani con tumore (1 osteosarcoma, 13 linfomi, 1 emangiosarcoma, 1 adenocarcinoma dei sacchi anali, 2 leucemie linfocitiche, 1 carcinoma vescicale ed 1 tumore cerebrale), solo in 14 casi si è potuto seguire l’andamento della cTnI e delle sottopopolazioni linfocitarie prima e durante la chemioterapia; con prelievi a distanza di 24 h dalla somministrazione del chemioterapico, durante l’intero ciclo di terapia. Negli altri 10 casi, non è stata effettuata nessun tipo di terapia oncologica per le già critiche condizioni di salute del paziente o per mancato consenso da parte del proprietario. In un caso è stato possibile seguire solo l’andamento della Troponina I Cardiaca (cTnI) a causa di insufficiente campione per la marcatura citufluorimentrica (caso n. 24). I 14 cani sottoposti a chemioterapia, sono stati divisi in 3 gruppi in base al protocollo chemioterapico utilizzato: Doxorubicina da sola o in associazione (gruppo 1, n.5 casi), Sali del Platino (gruppo 2, n. 5 casi) e Clorambucile (gruppo 3, n. 3 casi). E’ stato valutato anche un singolo caso trattato con Temozolomide, per il solo dosaggio della cTnI. I dati ottenuti dal dosaggio della cTnI e dalla marcatura delle sottopopolazioni linfocitarie nei controllo sani, ricalcano i dati presenti in bibliografia. Dal confronto dei due tempi (T0 – T1), per le sottopopolazioni linfocitarie, si è potuto osservare un calo significativo (P < 0,05), dei globuli bianchi totali e dei linfociti totali, sia nel gruppo 1 (Doxorubicina) sia nel gruppo 2 (Sali del Platino), ma non nel gruppo 3 (Clorambucile). Nel gruppo 1 (Doxorubicina), il calo era statisticamente significativo per le sole sottopopolazioni CD21+ (linfociti B), mentre nel gruppo 2 riguardava le sottopopolazioni CD3+ (linfociti T), con calo significativo dei soli linfociti CD4+ (T – Helper). La troponina I Cardiaca, ha mostrato aumenti in 3 casi su 5 del gruppo 1 (Doxorubicina) e del gruppo 2 (Sali del Platino), ma non nel gruppo 3 (Clorambucile). Gli aumenti sono stati più rapidi nel gruppo 2 (Sali del Platino).

SUMMARY Cardiotoxicity and Myelosuppression are among two of the side effects of some Chemotherapy agents mostly limiting their use. Both in human and veterinary medicine, these side effects do have a strong impact on both the patient’s life quality and his survival, irrespective of the basic oncologic problem. The need to determine highest cardiotoxicity risk patients in advance and a possible myelosuppression due to the chemotherapy protocol followed, becomes a crucial factor that can bring either to the adjustment or to the suspension of the Oncology therapy, followed by a cardiologic and/or an immunostimulatory help. The first aim of this study is to identify medicines involved into chemotherapy-induced cardiotoxicity, in order to determine a possible cardiac damage in advance by means of minimally invasive, sensitive, specific and easily repeatable laboratory tests. In this study we therefore suggest to use Cardiac Troponin I as an indicator for cardiac damage. The method used is the same applied in human medicine, which means it’s based on Immulite Troponin I immunometric chemiluminescent assay system, method ACCES ACCU TnItim on UNICELL DXL 800 system. The second aim is to highlight the effects that some Chemotherapy agents might have on the immune system, by looking for any variations in lymphocytes subpopulations of peripheral blood by means of Flow Cytometry and of the following panels of monoclonal antibodies: CD3, CD4, CD8 and CD21. A blood sample was taken from 34 dogs divided into two groups: n° 10 clinically healthy dogs (control group) and 24 dogs with cancer. Only in 14 cases out of the 24 dogs with cancer (1 osteosarcoma, 13 lymphomas, 1 hemangiosarcoma, 1 apocrine gland adenocarcinoma, 2 cases of lymphocytic leukemias, 1 bladder carcinoma and 1 cerebral tumor) we were able to follow up the pattern of cTnI and of lymphocytes subpopulations both before and during the treatment with Chemotherapy, blood sampling the subjects, 24 hours after agent chemotherapy agent administration the complete therapy cycle. In 10 cases no cancer treatment was made, due to the already critical patient’s health conditions or to the animal’s owner not giving his consent. In 1 case we were able to follow up just the pattern of Cardiac Troponin I (cTnI), due to insufficient sample for the Flow Cytometry (case n° 24). The 14 dogs treated with Chemotherapy were divided into 3 groups according to the Chemotherapy protocol followed: Doxorubicin alone or in association with other substances (group 1, n° 5 cases), Platinum Complexes (group 2, n° 5 cases) and Chlorambucil (group 3, n° 3 cases). We also made evaluations on a single case treated with Temozolomide, only for the dosage of cTnI. Data obtained from the dosage of cTnI and of lymphocytes subpopulations of healthy control groups reflect bibliographic data. By comparing the two times (T0-T1) for lymphocytes subpopulations, we could observe a significant decrease (P < 0,05) in the total number of white blood cells and total lymphocytes, both in group 1 (treated with Doxorubicin) and in group 2 (treated with Platinum Complexes) but not in group 3 (treated with Chlorambucil). In group 1 (Doxorubicin) the decrease was statistically significant just for the CD21+ (lymphocytes B) subpopulations, whereas in group 2 it involved CD3+ (lymphocytes T) subpopulations, with a significant decrease of just CD4+ (T-Helper) lymphocytes. Cardiac Troponin I showed an increase in 3 cases out of 5 in group 1 (Doxorubicin)

and in group 2 (Platinum Complexes), but not in group 3 (Chlorambucil). The increases were more rapid in group 2 (Platinum Complexes).